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標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性,低溫復性,適溫延伸的熱循環(huán),并遵守聚合酶鏈反應規律,與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應體系中,在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光,隨著(zhù)循環(huán)次數的增加,被擴增的目的基因片段呈指數規律增長(cháng),通過(guò)實(shí)時(shí)檢測與之對應的隨擴增而變化熒光信號強度,求得CT值,同時(shí)利用數個(gè)已知模板濃度的標準品作對照,即可得出待測標本目的基因的拷貝數。
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